計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來(lái)檢測(cè)微生物的新型培養(yǎng)基。它是一種新型分離培養(yǎng)基，利用顯色培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的篩選分離，其反應(yīng)的靈敏度和特異性大大優(yōu)于傳統(tǒng)培養(yǎng)基。這些相應(yīng)的顯色底物是由產(chǎn)色基因和微生物部分可代謝物質(zhì)組成，在特異性酶作用下，游離出產(chǎn)色基因顯示一定顏色，直接觀察菌落顏色即可對(duì)菌種作出鑒定。

　　計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)各適于該菌種生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無(wú)菌條件下進(jìn)行。啟開(kāi)菌種宜采用鋸開(kāi)法（鋸開(kāi)前用75%酒精棉消毒菌種管外壁）。用吸管將液體培養(yǎng)基0.3ml左右注入被啟開(kāi)的菌種安瓶中并吹打，使安瓶中的凍干菌種溶解成菌懸液。

　　將上述菌懸液全部吸出，分別接種到固體斜面和液體培養(yǎng)管中，一般放置在37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18~24小時(shí)。對(duì)需要特殊培養(yǎng)條件的細(xì)菌，如需5%~10%CO2或厭氧條件等，應(yīng)分別于CO2培養(yǎng)箱或厭氧培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基用法：

　　稱取本品23.5克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至45-50℃待用;

　　傾注法：

　　取適當(dāng)稀釋度的樣品液1ml加入無(wú)菌平皿中，再加入冷卻好的計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基約15ml,混合均勻，待培養(yǎng)基*凝固后，36℃培養(yǎng)24～48h進(jìn)行計(jì)數(shù)；

　　涂布法：

　　取冷卻至45-50℃培養(yǎng)基，傾入無(wú)菌平皿，待培養(yǎng)基*凝固后，在36℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時(shí)，加入適當(dāng)稀釋度的樣品液1ml，涂布于培養(yǎng)基上，36℃培養(yǎng)24～48h進(jìn)行計(jì)數(shù)。

　　操作步驟：

　　1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；

　　2、取樣品液1ml加入冷卻至45-50℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上；

　　3、36℃培養(yǎng)24～48h，選用有30～200個(gè)菌落的平板，計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基的計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的紅色菌落(不論其大小和顏色深淺均計(jì)數(shù))。