嗜血桿菌屬于菌科，是專性寄生的。屬細菌主要寄生在人的咽喉及膜，少于化道和生道。其中主要引起人類性化膿感染（性咽炎、喉炎、氣管炎、肺炎、中耳炎、鼻竇炎、心內膜炎、敗血癥、腦膜炎等）及嚴重的繼發感染，是引起軟性下疳的病原菌。本屬細菌對營養要求嚴格，生長時需血液中存在的生長因子，人工培養時必須供給新鮮血液才能生長，故名嗜血桿菌。

　　嗜血桿菌，需氧或性氧，在補充5~10%CO，的大氣中生長良好，適生長溫度為35~37，pH7.6～7.8，在pH7.6下生長較好。生長需要又因子、V因子或二一。是一種對熱穩定的，是一種含鐵的卟啉，為細菌合成過氧化氫酶、過氧化物酶、細胞色素氧化酶的輔基；是一種對熱不穩定的，是脫氫酶的輔酶，在細胞的呼吸中起氫的作用。紅細胞中含X及V因子，但羊血紅細胞中含有水解V因子的酶類，V因子性的嗜血桿菌通常不能在含有完紅細胞的羊血瓊脂上生長，因實驗室中常用巧克力瓊脂培養基上分離培養嗜血桿菌。

　　嗜血桿菌分離培養基以巧克力瓊脂較好，其中在巧克力瓊脂上的生長狀況好于羊血巧克力瓊脂，如兔血來源困難也可用羊血代替，但需一定量的（或）。在培養基中加入2%鮮酵母浸液和可菌落大。

　　呼吸道標本中的嗜血桿菌在初代培養時，受到革蘭陽性細菌的抑制（營養競爭及菌素作用），菌落細小不易與其他細菌相區別，這是造成嗜血桿菌分離率低的直接原因。在培養基中加入的或（或其他蘭陽性細菌抑制劑），可提高嗜血桿菌分離率。原因是，當在培養基中加入萬古霉素后，革蘭陽性細菌的生長，加了對嗜血桿菌的，嗜血桿菌在加萬古霉素的培養基上，菌落生長較大，從而提高了嗜血桿菌的分離率。